Introducción: La leptospirosis humana es una enfermedad infecciosa aguda que sin diagnóstico y tratamiento temprano puede conllevar a la muerte del paciente. En Cuba son escasos los estudios relacionados con la detección molecular de Leptospira en muestras de fallecidos.

Objetivos: Diseñar, normalizar y validar una Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) para la detección de ADN de especie patógena de Leptospira spp.

Materiales y métodos: Mediante herramientas computacionales se verificó la eficiencia de cebadores reportados en la literatura científica y se diseñaron otros que cumplieran estrictamente un conjunto de parámetros para su funcionalidad óptima. Con ellos se realizó la normalización de una PCR, ajustando variables como temperatura de hibridación y concentración de cebadores, y se determinó la sensibilidad y especificidad analíticas. Esta PCR se evaluó en tejidos infectados artificialmente con leptospiras patógenas y se aplicó a muestras de órganos frescos y embebidos en parafina de fallecidos con sospecha de leptospirosis, comparando los resultados con otras dos PCR reportadas.

Resultados: Se constató la falta de eficiencia teórica de los cebadores reportados en la literatura, así como la eficacia de los diseñados. La PCR normalizada con los nuevos cebadores resultó específica y más sensible que las PCR de referencia. Se demostró la utilidad de la técnica al confirmar la infección en el 34,7% (26/75) de las muestras de órganos frescos y 43,6% (24/55) de los embebidos en parafina.

Conclusiones: Esta nueva herramienta molecular fortalece las capacidades diagnósticas del Laboratorio Nacional de Espiroquetas y del país.